2026-03-30 17:00
作者 谷嬉嬉
京港感染论坛
智驱融合：重构感染诊疗新范式
新型隐球菌是一种全球关注的真菌病原体，世界卫生组织将其列为优先级最高的病原体之一[1]。这种真菌通常存在于土壤、腐烂的植物材料或鸟粪中，特别是在鸽粪的土壤中，感染通常是通过吸入感染性繁殖体（如孢子或干酵母）获得的，这些孢子或细胞会感染下呼吸道和肺泡。在免疫功能低下的人群中可导致严重的死亡率和发病率。在免疫功能正常的人群中，初次感染时，组织驻留细胞和先天免疫细胞会清除或控制感染，随后建立适应性记忆反应，以应对后续的暴露。
一、病史简介
患者，女，52岁，诉头痛明显，疼痛评分4分，收入我院。
既往史：多关节疼痛7年，胸闷、憋气1年余。1年前心脏在同步除颤器植入术。肺结节、类固醇糖尿病数年。
入院查体：T36.3℃，P64次/分，R18次/分，Bp96/63mmHg，疼痛评分4分，神志清，精神可，双肺呼吸音清，未闻及干湿性啰音。心界偏大，心音遥远，腹软，无压痛及反跳痛，双下肢无水肿。右上肢近端可见局部皮肤肿，压痛，局部破损，直径约2-3cm。
二、实验室检查
2026年2月22日血液相关检查
WBC 9.33×10^9/L、中性粒百分比93 %↑、CRP 11.47mg/L↑、cTNT 0.066ng/L↑，N-proBNP 2928pg/ml↑。
G试验161.77pg/ml，GM试验＜0.1ng/ml，结核感染T细胞检测阴性。其余生化、血沉、凝血和传染病检查未见明显异常。
2026年2月24日送检脑脊液相关检查
脑脊液常规检查：白色，微浑浊，脑内压320cmH2O，潘氏试验：阳性，体液白细胞数：807×10^6/L↑。葡萄糖：<0.30mmol/L↓，氯化物：123.4mmol/L↓，白细胞计数：911.00x106/L↑，脑脊液总蛋白：157.91mg/L↑；隐球菌墨汁染色（见图1）：阳性；隐球菌荚膜抗原：阳性（见图2）。
微生物学检测：脑脊液革兰染色涂片：酵母样真菌孢子(见图3)，镜下菌体呈圆形或卵圆形，染色后呈紫色，菌体周围有透明的晕圈，部分菌体可见出芽现象，芽颈细小与母体连接处似“藕断丝连”；无菌操作将脑脊液分别接种哥伦比亚琼脂平板、沙保罗琼脂平板，放置于含5%的CO2的孵育箱，35℃培养48小时，1-2mm乳白色细小菌落（见图4），鉴定为新型隐球菌。
同时送检病原微生物高通量测序，两日后回馈结果新型隐球菌，序列数829237，置信度99%。
最终诊断：新型隐球菌性脑膜炎。
治疗：予以两性霉素B脂质体联合氟康唑抗真菌治疗，头痛症状好转。
图1 墨汁染色镜下图 20X
图2 隐球菌荚膜抗原检测（阳性）
图3 革兰染色镜下图 20X
图4 新型隐球菌菌落(血琼脂平板和SDA平板，35℃，2日，菌落奶白色，粘稠，不透明，边缘完整）
三、总结
隐球菌性脑膜炎是成年人中最常见的机会性真菌脑膜炎，好发于免疫功能异常者。该病例患者为系统性红斑狼疮患者，长期服用免疫抑制剂，这类药物在抑制免疫排斥的同时，也降低了机体对新型隐球菌等病原体的抵抗力，从而使得感染这类病原体的风险显著升高。隐球菌感染始于肺部，但在免疫抑制后，新型隐球菌会从肺部系统逃逸，扩散至包括脑部在内的其他器官，从而引发隐球菌病最严重的表现形式——隐球菌性脑膜炎[2]。隐球菌性脑膜炎的症状包括发热、剧烈头痛、意识混乱以及颅内压升高，其死亡率在13%至78%之间[3]。为了改善患者的预后，早期发现隐球菌的扩散并及时开始抗真菌治疗至关重要。
隐球菌生长缓慢，培养2-5天菌落呈奶白色至棕黄色、粘稠、不透明，边缘完整。比其他常见念珠菌生长慢。且一般染色方法难以着色，常用墨汁负染色法，在黑色背景下可见圆形或卵圆形的菌体，外有一圈肥厚透明的荚膜。
通过此病例告诉我们：细菌和真菌涂片染色在微生物检验和临床诊断中具有至关重要的地位，它有助于病原菌的初步鉴定，是病原学诊断的经典方法，也是早期经验性选择抗生素的重要依据。
四、启发
在微生物检验的日常工作中，有一种经典技术值得我们始终坚守——那就是传统的涂片染色。
涂片染色不仅是微生物检查中最直观、最快速、最经济的手段，更是检验人员发现问题的第一双“眼睛”。借助镜下形态特征的提示，我们可以及时调整检免疫功能低下者检验策略：比如适当延长培养时间、更换特殊培养基，或引入PCR等分子生物学方法进行验证。这种主动应对，不仅能有效弥补单纯依赖培养可能带来的漏检，也为临床精准诊疗提供了更可靠的依据。
更重要的是，涂片染色提醒我们：每一份标本背后，都是一位真实的患者。临床微生物工作，不仅是技术的操作，更是思维的锤炼。只有善于观察、勤于思考、不断积累经验，才能在显微镜下发现更多细节，在细节中探寻真相，在真相中服务临床。
参考文献（上下滑动）
1.Fisher MC, Denning DW: The WHO fungal priority pathogens list as a game-changer. Nat Rev Microbiol 2023, 21(4):211-212.
2.Muselius B, Roux-Dalvai F, Droit A, Geddes-McAlister J: Resolving the Temporal Splenic Proteome during Fungal Infection for Discovery of Putative Dual Perspective Biomarker Signatures. J Am Soc Mass Spectrom 2023, 34(9):1928-1940.
3.Hevey MA, Presti RM, OʼHalloran JA, Larson L, Raval K, Powderly WG, Spec A: Mortality After Cryptococcal Infection in the Modern Antiretroviral Therapy Era. J Acquir Immune Defic Syndr 2019, 82(1):81-87.
谷嬉嬉
主管技师，北京大学人民医院青岛医院检验科微生物室组长，担任山东省大数据研究会医学分会委员、山东省医药生物技术学会检验医学分会委员。主要从事临床微生物工作，研究方向为细菌耐药机制的研究。主持青岛市医药卫生项目1项（在研），发表多篇北大核心和SCI文章。
END
作者｜谷嬉嬉（北京大学人民医院青岛医院）
审校｜王占伟（北京大学人民医院）