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【规范与指南】《中枢神经系统感染性疾病实验诊断标准》学习汇报

2026-09-03 17:00

作者 王芬、宁永忠


京港感染论坛

十五砺新,探微致远




2026年5月25日,国家卫生健康委员会发布了推荐性卫生行业标准——《中枢神经系统感染性疾病实验诊断标准》(WS/T 883-2026),该标准将于2026年11月1日起正式实施,是我国首部针对中枢神经系统(Central Nervous System,CNS)感染性疾病实验诊断的专项行业标准,将为各级医疗机构临床实验室开展CNS感染性疾病的实验诊断提供规范化指导。笔者作为一名微生物学检验人员,深知CNS感染性疾病实验室诊断的痛点和难点,通过认真学习该标准,我们整理了一份学习心得,供同行参考,讨论交流。



一、分析前流程

《中枢神经系统感染性疾病实验诊断标准》(WS/T 883-2026)起草单位:中国医学科学院北京协和医院、华中科技大学同济医学院附属同济医院、河北医科大学第二医院、首都医科大学附属北京天坛医院、首都医科大学附属北京佑安医院、山东大学齐鲁医院、复旦大学附属儿科医院。主要起草人:徐英春、刘亚丽、孙自镛、赵建宏、张丽、于艳华、关鸿志、徐硕、张国军、曾玫。向各位专家致敬!


二、重点内容解读

(一)不同CNS感染性疾病类型的检测路径

将CNS感染性疾病分为脑膜炎,脑炎,脑实质局灶性感染,中枢神经系统分流性感染,硬膜下脓肿、硬膜外脓肿和化脓性颅内血栓性静脉炎五种类型,总结了不同感染类型可能的病原体,并对不同病原体的标本类型及检测方法进行了推荐,见表A.1、A.2。


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宁按:

1.注意区分不同患者状态(如年龄、风险因素、社区获得还是医院获得)。不同状态的病原谱,有不同。


2.一般而言,都可以核酸检测。上面表格中没有写核酸检测的,如果mNGS或tNGS或某种类型PCR有真阳性检出,可以考虑是否作为诊断证据。当然不都是诊断证据,可依据国际指南等进一步分析。


3.其中“嗜吞噬细胞微粒孢子虫属”应该是Anaplasma phagocytophilum。目前应该翻译为“嗜吞噬细胞无形体”。因为是细菌,翻译为“虫”不太合适。这是种名,翻译为属不太合适。万方数据中检索题名:"Anaplasma phagocytophilum",自动匹配嗜吞噬细胞无形体。而题目、摘要检索“嗜吞噬细胞微粒孢子虫”,均无结果。


4.脑膜炎奈瑟菌有生物安全风险。该菌气溶胶感染风险高、感染剂量低,实验室获得性感染病死率高。主要风险来自分离后的纯培养物(脑脊液、血液等无菌部位标本原始标本风险低于扩增后的菌落),注意在生物安全柜(状态符合预期)进行操作。


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宁按:

1.真菌中念珠菌需要考虑。Pubmed中检索(Meningitis[Title] OR Encephalitis[Title]) AND "candida"[Title],有近200条。对于中枢神经系统损伤/手术、新生儿、免疫受损等情况,鉴别诊断需要考虑念珠菌。目前Pubmed中多数为病例报道。爱尔兰2023年一篇文章(Br J Neurosurg. 2023 Apr;37(2):227-230.)提到,在 851 份脑脊液(CSF)培养阳性标本中,29 份(3.4%)检出念珠菌属,对应 12 例患者发生感染。注意,这里没有检测核酸;如果检测,阳性结果会更多。对于培养,念珠菌阳性的阳性预测值是12/29=41.4%。


2.脑脊液新型隐球菌的墨汁染色和培养,都可以定量报告。——用于治疗效果的评价判断。


3.朊病毒是脑炎病原,确实患者极少。国际上检测方法很多。针对脑脊液的,如:实时震颤诱导转化实验(Real-time quaking-induced conversion,RT-QuIC)、神经元特异性烯醇化酶(Neuron-specific enolase,NSE)、Tau、14-3-3 protein。针对脑组织等的,如常规组织学检查、朊蛋白免疫染色、朊蛋白免疫印迹试验(Western blot)。针对血液的基因检测(PRNP基因)等。国内有Tau、14-3-3 protein两个检测的试剂。


4.安全角度,球孢子菌、朊病毒需要关注。


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宁按:

1.在表格中没有明确写测序检测。只写了核酸检测。前面定义中,有6.6.3高通量测序。内容提到mNGS,没有提tNGS。二者是中国特色,体现在脑脊液/脑组织检查中,符合目前实际情况。需要强调的是,不要以单一一次检查结果直接确诊。二者都会有假阳性,一方面其结果需要验证;一方面需要同时有第二个证据。——此时针对二者的阳性结果,进行靶向PCR检查,是最佳选择。当然也需要结合其他方式,如隐球菌的荚膜多糖抗原检测等;需要结合临床。


笔者对表A.1、A.2的内容进行归纳,整理了不同感染类型的常见病原体及检测路径,见下表。


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(二)标本采集、运送及传统微生物学检测

1. CNS感染性疾病实验诊断的标本类型通常包括脑脊液、引(分)流液、脓液及脑组织等,应尽可能在抗微生物药物使用前采集标本。——宁按,注意引流液、分流液需要考虑置管时间。引流液在24hr内,等同于脑脊液;超过72hr,一般导管会有定植,分离株不能等同于感染病原。


2. 严格无菌操作采集标本,采用含碘消毒液或75%酒精,对引流穿刺部位进行不少于3次自内向外的消毒。


3. 由于脑脊液及引(分)流液采集过程中可能引入皮肤微生物,应讲究分管顺序:第一管宜做生化学或免疫学检查。如标本充足(≥5 mL),第二管推荐用于细菌培养、革兰染色、隐球菌荚膜多糖抗原、真菌培养、钙荧光白染色等,第三管推荐用于分枝杆菌培养,第四管推荐用于细胞学检查,第五管推荐用于病毒核酸检测等。


4. 采集的标本,尽可能在30 min内送到实验室。某些病原菌,如淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌和厌氧菌等,对低温敏感,标本不宜冷藏。


5. 如怀疑厌氧菌感染(如脑室引流液),宜将标本置入无菌厌氧转运培养基内立即送检,避免冷藏;条件允许时可进行床旁接种。


6. 如送检标本量不足,应与临床医生沟通,确定检查项目的优先级。


7. 原则上不宜拒收脑脊液、脑组织等难获得标本。当出现未贴标签,或标签与检验申请单不符;标本漏出、容器破损或可能被污染;送检延迟;未按规定条件保存等情形时,应及时与医生沟通;有条件时,可重新留取标本。宁按,让步检验需要作好记录和标识。


8. 脑脊液用于涂片时,推荐优先使用细胞离心机离心,其灵敏度优于普通离心机离心和不离心。没有细胞离心机时,可采用普通离心机离心后取沉淀涂片。如脑脊液标本混浊,或标本量少,可在载玻片上滴加脑脊液1滴~2滴直接涂片。(需注意不同染色方法的离心力要求不同,应严格按照操作要求执行。)宁按,定量的时候,需要记录离心浓缩倍数。


9. 用于涂片和细菌培养的脑组织标本宜在研磨器内研磨或超声处理,吸取匀浆制备涂片,并接种至合适的培养基;用于真菌培养的脑组织,剪碎组织(避免研磨)后接种;用于寄生虫检查的脑组织,不应研磨,后续分别用于印片、固定或培养。


10. 需氧培养至少接种血琼脂平板和巧克力琼脂平板,接种前宜记录标本量(mL)、性状(颜色、透明度等)。若标本量大于1 mL,可接种脑心浸液肉汤或血培养瓶。不能只做普通细菌培养(需氧培养),根据临床怀疑和标本类型,应主动考虑厌氧菌、分枝杆菌和真菌。


(三)抗原、抗体、核酸检测的定位与价值

在CNS感染性疾病实验诊断中,抗原、抗体、核酸检测的定位不同,诊断价值也各有差异,见下表。


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宁按:核酸检测因其灵敏性,有假阳性的可能——mNGS也有假阳性。因此单一一次核酸阳性结果,严格的专业意义角度来讲,不能直接确诊。需要验证一下。(前面mNGS部分已经强调过;这里是整体上就核酸检测进行强调,包括PCR等技术)


(四)危急值与结果报告

中枢神经系统标本所有阳性结果(包括革兰染色阳性、培养阳性、核酸检测阳性、抗原检测阳性)应作为危急值处理,并通过LIS系统或电话向临床报告结果。该标准详细列出了不同检测方法的结果报告规范。


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(五)生物安全管理

常规工作中,应优先处理中枢神经系统来源标本,在生物安全柜内操作。


三、临床实验室的应对策略

1. 《中枢神经系统感染性疾病实验诊断标准》(WS/T 883-2026)将于2026年11月1日起正式实施,临床实验室应组织科内专项学习,梳理现有SOP,查漏补缺;


2. 制定标本采集手册,并对CNS感染性疾病重点科室医护人员进行培训,确保标本采集质量;


3. 建立CNS感染性疾病实验室检测标本优先处理机制,和临床共同制定送检路径,确保在最短时间内报告结果;


4. 与临床科室建立沟通机制,针对CNS感染性疾病实验室检测方法的选择及结果解读进行深入沟通,使临床用好现有“武器”;


5. 完善细菌、真菌、分枝杆菌、寄生虫检测能力,培养CNS感染性疾病实验诊断专业技术人员;


6. 强化危急值管理,CNS感染性疾病实验室检测标本所有阳性结果均应作为危急值,及时通过LIS或电话报告。


宁按:对细菌真菌流程,行标配图如下:


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1.脑脊液标本有没有质量判断?答案是有。脑脊液凝固酶阴性葡萄球菌分离株,有没有可能是皮肤定植菌?答案是有可能(类似血培养)。——这是需要提前知道的信息。


2.这个图左侧,体积小于1mL的优先级:医嘱优先级,大多数情况下需要和医生直接(电话/微信/当面)沟通。


3.这里的革兰染色,一方面是微生物学的essential(基本的,必须的)检查;一方面是急查,按照危急值流程运转;一方面有专业挑战性。后者,比如患者已经使用抗生素,那革兰染色阳性的肺炎链球菌,会看起来像是阴性菌。——需要检查人员提前参与培训考核、具备一定经验。


4.图左侧需氧培养里,“血培养瓶”字面容易误解,叫“(商品化)增菌培养瓶”更合适。这里的时间其实不太好界定。比如不除外真菌,可以放4周,特殊情况可以8周(见右侧)。


5.图右侧需氧培养同上。厌氧培养、真菌培养、分枝杆菌培养,都有对应的(商品化)增菌培养瓶。


6.这个图把涂片和培养并列,是正确的专业理念。部分理解把涂片当作培养的前提(也不仅仅限于脑脊液培养),专业角度不太合适,也不符合实际工作。后者指,有时候会诊会遇到只有培养没有涂片结果的情况——并不少见,难道会诊对有意义的培养结果不予采纳、不予分析吗?肯定不会的。我们一直倡导涂片与培养同时进行。但并不是将涂片置于培养的前提条件。


7.图中没有核酸/免疫检测,没有病毒/寄生虫检测,行标其他部分也没有撰写。核酸、免疫检测,也可以类似出一个流程图;或者和涂片、培养,形成一个大的流程图。


8.从排版角度,技术细节放在下面说明里更好。这样一方面绘图可以简洁容易一些,减少排版难度;一方面重复的内容可以合并。


宁按:近两年报道的脑炎/脑膜炎新病原如下。部分可能只是新发现,有流行病学关联,但致病性、病原地位还没有完全确认。具体包括:


细菌类:

Pandoraea pnomenusa:首次报道

■ Kuriakose Thomas N, Nanayakkara BCIJ, Veeraraghavan B, Vivek Joseph B. Postoperative meningitis due to Pandoraea pnomenusa in a child with recurrent medulloblastoma: first CSF-proven case. Indian J Med Microbiol. 2026 Jul 21;64:101222. doi: 10.1016/j.ijmmb.2026.101222. Epub ahead of print. PMID: 42480763.


Borrelia miyamotoi:宫本疏螺旋体,硬蜱传播;B 细胞耗竭治疗后脑膜炎;影像学类似结核性脑膜炎

■ Dambietz CA, Kintzinger T, Schuler F, Albers A, Suntrup-Krueger S, Fingerle V, Meyer Zu Hörste G, Thomas C. Nanopore sequencing identifies Borrelia miyamotoi as an unexpected cause of meningitis after B cell depletion. Neuropathol Appl Neurobiol. 2024 Dec;50(6):e13017. doi: 10.1111/nan.13017. PMID: 39511958; PMCID: PMC11618485.


Streptococcus intermedius:近几年病例报道增多

■ Chen YC, Chang FY, Shang ST, Wang YC. Novel Use of Metagenomic Next-Generation Sequencing in Diagnosing Streptococcus intermedius Meningitis and Ventriculitis: A Case Report and Literature Review. Infect Drug Resist. 2024 Dec 11;17:5507-5512. doi: 10.2147/IDR.S495313. PMID: 39676846; PMCID: PMC11646375.


真菌类:

Cryptococcus albidus:2025年3个报道

■ Prasad A, Singh M, Anand P. Cryptococcus albidus (Naganishia albida) meningitis in a young patient with T-cell acute lymphoblastic leukaemia. Access Microbiol. 2025 Oct 15;7(10):000920.v4. doi: 10.1099/acmi.0.000920.v4. PMID: 41104066; PMCID: PMC12527640.


■ Wang G, Liu H, Wang X, Li Z. Cryptococcus albidus meningitis: A case report and literature review. Medicine (Baltimore). 2025 Apr 25;104(17):e42125. doi: 10.1097/MD.0000000000042125. PMID: 40295272; PMCID: PMC12040010.


病毒类:

Hucaurvirus:一种暂命名为 hucaurvirus 的高度分化RNA病毒,可能代表 Tolivirales 目下的一个新病毒科。国内发现!

■ Zhang J, Zhao Y, Li W, Xu J, Chen Y, Yang S, Wu P, Li Y, Zhou C, Zhang W. Viromic analysis of cerebrospinal fluid (CSF) samples identified an unclassified RNA virus exhibiting an atypical genomic architecture. BMC Microbiol. 2025 Nov 25;25(1):776. doi: 10.1186/s12866-025-04360-2. PMID: 41291413; PMCID: PMC12645703.


Recombinant Echovirus 6/Coxsackievirus B1 Enterovirus:新的重组病毒

■ Cherabuddi K, Tagliamonte MS, Lednicky JA, Ostrov DA, Moquin TL, Thoomkuntla VK, Bourgeois B, Kollu VS, Iovine NM, Myers PD, Subramaniam K, Salemi M, Morris JG Jr. A Case Cluster of Aseptic Meningitis Associated With a Newly Identified Recombinant Echovirus 6/Coxsackievirus B1 Enterovirus. J Infect Dis. 2025 Sep 15;232(3):e486-e495. doi: 10.1093/infdis/jiaf247. PMID: 40359283; PMCID: PMC12455311.


Trubanaman Virus

■ Hajkowicz K, Woodford J, Pillai ES, Henden A, Lowry K, Petrone ME, Harris PNA, Holmes EC. Metatranscriptomic Identification of Trubanaman Virus Sequences in Patient with Encephalitis, Australia. Emerg Infect Dis. 2025 Dec;31(12):2332-2335. doi: 10.3201/eid3112.251190. PMID: 41490800; PMCID: PMC12782261.


Snowshoe Hare Virus:雪兔病毒,2024 报道儿童聚集性脑膜脑炎

■ Ali F, Imperial M, Morshed M, Goldfarb DM, Gubbay JB, Hogan CA, Vijh R, Andres EN, Jaeckel M, Sajan J, Wood H, Robinson A, Tam J. Pediatric Meningoencephalitis Cluster Caused by Snowshoe Hare Virus, Whistler, British Columbia, Canada, 2024. Emerg Infect Dis. 2026 Apr;32(4):477-483. doi: 10.3201/eid3204.251392. PMID: 41986254; PMCID: PMC13094835.


Cache Valley Virus:卡奇谷病毒,2026 报道首例儿童病例,莫努匹韦治疗后脑脊液病毒清除,停药复发

■ Byrd DS, Ananth A, McDonald C, Atkinson TP, Chiu CY, Kimberlin DW, Marcus L. Molnupiravir Treatment Associated With Clearance of Cache Valley Virus From Cerebrospinal Fluid in an Immunocompromised Child With Meningoencephalitis. Open Forum Infect Dis. 2026 Apr 18;13(5):ofag217. doi: 10.1093/ofid/ofag217. PMID: 42146327; PMCID: PMC13175980.


伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus

■ 刘一诺,陈新宇,王爱华,等。伪狂犬病病毒感染致人病毒性脑炎 1 例并文献复习 [J]. 中国感染控制杂志,2026,25 (4):593‑597.DOI:10.12138/j.issn.1671‑9638.20253067


■ Xing F, Zhao B, An L, Zhang J. Pseudorabies Virus-Associated Encephalitis with Endophthalmitis. Ann Neurol. 2025 Dec;98(6):1275-1277. doi: 10.1002/ana.70027. Epub 2025 Aug 8. PMID: 40879103.


乙肝病毒:除了嗜肝性,是否也会引起脑炎、脑膜炎?

■ Dong DV, Linh LTK, Cao LC, Linh NTK, Huyen LT, Wedemeyer H, Kremsner PG, Song LH, Velavan TP. Hepatitis B virus detected in cerebrospinal fluid of an immunocompetent adolescent with meningoencephalitis. Int J Infect Dis. 2026 Feb;163:108265. doi: 10.1016/j.ijid.2025.108265. Epub 2025 Nov 26. PMID: 41314331.


寄生虫类:

Balamuthia:巴拉姆希阿米巴新的遗传谱系

■ Teng Z, Liu L, Chen T, Liang J, Yao X, Zhao N, Zhao F, Sun H, Wang L, Wang Q, Liu G, Qin T. A Novel Balamuthia Lineage Causing Fatal Granulomatous Amoebic Encephalitis in an Immunocompetent Infant. Int J Infect Dis. 2025 Dec;161:108063. doi: 10.1016/j.ijid.2025.108063. Epub 2025 Sep 17. PMID: 40972811.


Taenia martis:马绦虫,欧洲首例人神经囊尾蚴病,首次发现中枢侵袭病例

■ Santoro A, Di Grazia A, Cuntrò M, Gervasi E, Baldassarri L, Arosio M, Lacavalla M, Cherchi S, Ludovisi A, Santolamazza F, Tartarelli I, Celani F, Raglio A, Carretto E, Casulli A. Human neurocysticercosis unexpectedly caused by Taenia martis in Italy: a case report and literature review. Parasit Vectors. 2026 May 15;19(1):273. doi: 10.1186/s13071-026-07420-2. PMID: 42141480; PMCID: PMC13330242.


Taenia solium:猪带绦虫,是脑内成虫(不是幼虫囊尾蚴),世界首例

■ Gomez Puerta LA, Ramirez Gutierrez CA. Letter to the Editor. Adult Taenia solium in human brain. J Neurosurg Case Lessons. 2026 Mar 9;11(10):CASE25828. doi: 10.3171/CASE25828. PMID: 41802293; PMCID: PMC12970311.


上面有全新发现的微生物,也有已知微生物的新感染形式。相对而言,还是病毒略多一些。无疑,这些“新”都需要进一步确认——包括确证其致病性和病原谱地位等,值得关注。



作者简介


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王芬

重庆市两江新区人民医院检验科,医学博士,副主任技师,四川省医师协会第三届检验青年医师委员会委员、四川省预防医学会病原微生物与生物安全管理分会第一届委员会委员。

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