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【前沿速递】革兰阴性杆菌中碳青霉烯酶检测方法(sCIM) 的简介

2018-11-01 22:45

作者 曾吉

碳青霉烯酶检测

2018年10月Frontiers in microbiology刊登了武汉市第四医院检验科曾吉等一篇关于碳青霉烯酶检测的文章, 该文章介绍了一种新的碳青霉烯酶检测方法simplified carbapenem inactivation method (sCIM)该方法可以简便地检测肠杆菌科细菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中的碳青霉烯酶。实验选择了196株肠杆菌科细菌、73株鲍曼不动杆菌和158株铜绿假单胞菌进行测定,共检测出225株产酶株,酶型包括KPC-2、IMP-4、IMP-2、VIM-1、VIM-2、VIM-4、NDM-1、OXA-23和OXA-48在肠杆菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中,sCIM与PCR实验结果基本一致;在肠杆菌和铜绿假单胞菌中,sCIM和mCIM实验结果基本一致。

sCIM与mCIM检测原理相似,都是基于碳青霉烯酶能水解碳青霉烯类抗生素, 但sCIM操作方法较mCIM更简单,更加适合临床实验室常规操作,现将sCIM检测方法简述如下:

将过夜生长的大肠埃希菌ATCC25922用肉汤调到0.5麦氏单位,如果待测菌为肠杆菌科细菌,将菌液直接涂到M-H平板上,如果待测菌为鲍曼不动杆菌或铜绿假单胞菌,将菌液稀释10倍后再涂到M-H平板上(同K-B法)。取一张亚胺培南药敏纸片,用纸片的一面直接粘取过夜生长的待测菌菌落,使纸片的一面全部涂上待测菌(图1),再将有菌的一面贴到涂有大肠埃希菌ATCC25922的M-H平板上。35℃孵育16~18小时后测量亚胺培南的抑菌环,抑菌环小于20mm(图2)或抑菌环为21~22mm,环中大肠埃希菌菌落出现卫星现象为阳性(图3)。 如果抑菌环大于25mm则判断为阴性。介于二者之间为不确定的结果。

需要注意的是sCIM在检测亚胺培南敏感的菌株时,可能会有极少量的假阳性出现。

图1 :亚胺培南纸片粘取待测菌
图2:sCIM检测结果
图3:sCIM实验结果(卫星现象)
参考文献

Xiaopeng Jing,HuanZhou,Xiaochuan Min,Xing Zhang,Qing Yang,Shuaixian Du,Yirong Li,Fangyou Yu,MinJia,Yu Zhan,Yi Zeng,Bo Yang,Yunjun Pan,Binghuai Lu,Rong Liu,Ji Zeng*.The simplified carbapenem inactivation method(sCIM) for simple and accurate detection of carbapenemase-producing gram-negative bacilli. Frontiers in microbiology. 2018 Oct;doi:10.3389/fmicb.2018.02391.

作者:曾   吉 武汉市第四医院检验科

审阅:余方友 上海市肺科医院

           陈宏斌 北京大学人民医院

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