美国临床实验室标准化委员会 (CLSI)于2017年11月推出了酵母菌肉汤稀释法抗真菌敏感性试验参考方法（第四版）。该文件代替2008年发表的版本 (M27-A3)，M27-S4与M44-S3合并为M60。该文件主要内容包括抗真菌药物的选择和准备，试验的步骤和解释以及质量控制的目的和要求。该文件适用于引起侵袭性真菌感染的酵母菌，包括念珠菌属和新型隐球菌，不适用于霉菌和双相真菌的酵母相，如皮炎芽生菌和荚膜组织胞浆菌。使用者为进行酵母菌抗真菌敏感性试验的实验室人员。

该文件共分为6个章节，包括引言，抗真菌敏感性试验的准备，酵母菌肉汤稀释法抗真菌敏感性试验步骤，质量体系本质：过程管理-质量控制，总结，补充信息。以下简要介绍各章节的主要内容：

第一章：引言

该章节包括使用范围、背景、标准预防措施和专业术语的介绍，强调了该标准适用于引起侵袭性真菌感染的酵母菌，商品化的药敏试验系统超出该标准的使用范围，并加入了“野生型”和“非野生型”(“wild-type”and “non-wild-type”)的定义。

第二章：抗真菌敏感性试验的准备

该章节包括进行抗真菌药敏试验的指征和抗真菌药物的选择和报告。文件指出，对于需要抗真菌治疗的临床菌株，不能通过菌种鉴定预测敏感性时，都应进行敏感性试验。在耐药性流行病学研究和新型抗真菌药物研究中，对于可预测敏感性的某些菌种，敏感性试验同样重要。

第三章：酵母菌肉汤稀释法抗真菌敏感性试验步骤

该章节包括抗真菌药物的准备，储液的准备，试验步骤，敏感性实验结果的读取和解释。文件指出，对于宏量肉汤稀释法，试验菌株和质控菌株都应在48h读取结果；对于微量肉汤稀释法，试验菌株和质控菌株都应在24h读取结果，隐球菌属应在72h读取结果；在M27-A3中，某些抗真菌药物可在24h和/或48h读取结果；该章节加入了删除伊曲康唑和氟胞嘧啶折点的解释并删除了酮康唑的结果解释；酵母菌肉汤稀释法抗真菌敏感性试验流程图如下：

第四章：质量体系本质：过程管理-质量控制

该章节在质量控制的目的和责任，质控菌株的选择、储存和常规使用，培养基和塑料耗材的控制，质控的频率以及其他质量控制步骤等方面，对质量控制的过程和意义阐述十分详细，实验室应参照文件严格执行质量控制。

第五章：总结

该文件概述了进行抗真菌敏感性试验的必要步骤，包括培养基和材料的准备、试验步骤、质量控制和结果解释。参照该标准，实验室能够进行满足质量标准的抗真菌敏感性试验。

第六章：补充信息

包括参考文献，附录，质量管理体系要求和相关CLSI文件。

该文件主要更新内容：

整体

-   文件形式和结构的修改；

-   更新补充信息的参考文献，M27-S4与M44-S3合并为M60；

-   增加流行病学界值，CLSI文件M57和M59的参考文献；

章节1.4.2，定义

-   修改折点和解释分类的定义，与其它抗菌药物敏感性试验文件一致；

-   增加“野生型”和“非野生型”(“wild-type”and “non-wild-type”)的定义；

-   删除“解释标准”(“interpretivecriteria”)的使用

第三章，抗真菌敏感性试验步骤

-   加入真菌敏感性试验步骤流程图；

-   代替说明步骤的表格；

-   加入删除伊曲康唑和氟胞嘧啶折点的解释；已公布的折点基于最小的临床数据建立，更新的数据表明已公布的折点不正确，因此，已公布的折点不再使用；

-   修改微量肉汤稀释法读取结果的时间，对于临床菌株和质控菌株均为24h，在M27-A3中，某些抗真菌药物可在24h和/或48h读取结果；

-   删除酮康唑的结果解释。

Reference

CLSI. ReferenceMethod for Broth Dilution Antifungal Susceptibility Testing of Yeasts. 4th ed.CLSI standard M27. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute;2017.

投稿人：靳龙阳  王辉  北京大学人民医院

责任编辑：王辉  北京大学人民医院